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HPV快檢丨MIRA技術結合Cas12a 多樣診斷方法

閱讀：759發布時間：2023-8-14

HPV快檢MIRA技術結合Cas12a 多樣診斷方法

人乳頭瘤病毒（HPV）感染是婦女宮頸癌的主要病原體。2018年，約有31.1萬名婦女死于宮頸癌，其中85%以上的死亡發生在低收入和中等收入國家。使用一種簡單和快速的方法早期檢測HPV對于宮頸癌的治療作用極其重要，特別是在沒有專業設備的地區。

湯光輝博士課題組使用安普未來MIRA技術發布了兩篇科研文章，針對HPV的檢測分別開發出膠體金試紙條檢測和熒光檢測兩種簡單、快速的診斷方法。

使用MIRA技術結合CRISPR-Cas12a對13種高危人乳頭瘤病毒（HR-HPV）檢測開發了簡單快速診斷方法-比色讀數與橫向流動TESTOR，在《Bioactive Materials》期刊做了“An enhanced method for nucleic acid detection with CRISPR-Cas12a using phosphorothioate modified primers and optimized gold-nanopaticle strip"文章發表，影響因子16.874。

HPV快檢丨MIRA技術結合Cas12a 多樣診斷方法

用磷酸修飾引物，設計crRNA，當37℃反應條件中，MIRA與Cas12a組分在同一反應體系內，首先啟動MIRA擴增，擴增后的靶序列隨后被Cas12a-crRNA進行識別。crRNA與靶點結合激活Cas12a的內切酶活性，并開始切割附近的報告探針，釋放熒光信號。

通過這些創新，將擴增和檢測集成到一個單一的反應系統中，封閉環境中完成檢測，避免了脫蓋容易導致的假陽性和氣溶膠風險，同時可對此開發便攜式檢測盒。

HPV快檢丨MIRA技術結合Cas12a 多樣診斷方法

（TESTOR工作流程示意圖）

HPV快檢丨MIRA技術結合Cas12a 多樣診斷方法

（檢測13種HR-HPVs）

并且實驗中使用了HPV16和HPV18的臨床樣本驗證了該方法的檢測性能，TESTOR檢測與qPCR檢測的陽性和陰性一致性均為99%。

（臨床樣本檢測）

TESTOR檢測能夠在不同的環境中進行測試，如機場、診所、當地社區和其他地點。

（上述信息均來源于文章：

/science/article/pii/S2452199X21002255）點擊底部閱讀原文，即可查閱原文

發表在《Scientific Reports》期刊的“A simple and rapid diagnostic method for 13 types of high?risk human papillomavirus (HR?HPV) detection using CRISPR?Cas12a technology"研究中，提出了一種使用MIRA技術結合CRISPR-Cas12a對13種HR-HPVs進行非基因分型檢測的方法，通過該方法可以清楚地識別HR-HPVs個體的感染狀態，這是在單個反應中實現多個HPV檢測的個報告。